跑胶是从负极到正极 跑胶


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  • Q1:生物实验中的“跑胶”是什么意思?
    就是电泳分离的意思 。琼脂糖凝胶电泳 琼脂糖凝胶电泳是用琼脂或琼脂糖作支持介质的一种电泳方法 。对于分子量较大的样品,如大分子核酸、病毒等,一般可采用孔径较大的琼脂糖凝胶进行电泳分离 。理琼脂糖凝胶电泳是用琼脂糖作支持介质的一种电泳方法 。其分析原理与其他支持物电泳最主要区别是:它兼有"分子筛"和"电泳"的双重作用 。琼脂糖凝胶具有网络结构,物质分子通过时会受到阻力,大分子物质在涌动时受到的阻力大,因此在凝胶电泳中,带电颗粒的分离不仅取决于净电荷的性质和数量,而且还取决于分子大小,这就大大提高了分辨能力 。但由于其孔径相比于蛋白质太大,对大多数蛋白质来说其分子筛效应微不足道,现广泛应用于核酸的研究中 。蛋白质和核酸会根据pH不同带有不同电荷,在电场中受力大小不同,因此跑的速度不同,根据这个原理可将其分开 。电泳缓冲液的pH在6~9之间,离子强度~为最适 。常用1%的琼脂糖作为电泳支持物 。琼脂糖凝胶约可区分相差100bp的DNA片段,其分辨率虽比聚丙烯酰胺凝胶低,但它制备容易,分离范围广 。普通琼脂糖凝胶分离DNA的范围为,利用脉冲电泳,可分离高达10^7bp的DNA片段 。DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应 。DNA分子在高于等电点的pH溶液中带负电荷,在电场中向正极移动 。由于糖-磷酸骨架在结构上的重复性质,相同数量的双链DNA几乎具有等量的净电荷,因此它们能以同样的速率向正极方向移动 。准备干净的配胶板和电泳槽琼脂糖凝胶电泳:水平电泳注意DNA酶污染的仪器可能会降解DNA,造成条带信号弱、模糊甚至缺失的现

    Q2:PCR跑胶的目的是找到目的片段,我们怎么知道哪个是
    设计引物的时候你就应该知道是多大片段了啊,不然你的引物是怎么设计出来的?

    Q3:电泳跑胶SDS-PAGE的定义是什么?
    1,提取蛋白的时候要充分超声粉碎,然后高速离心 。吸取上清的时候不要触到沉淀 。污染不一定是rna和dna,还有可能是胶里面有杂质 。2.遇热膨胀过度,你可以在电泳槽里面安放冰槽,电泳液预先降温,同时降低电泳时的电流 。还有配琼脂也要用缓冲液,而不是水,不然不导电 。接触不好也会引起条带变形

    Q4:脂蛋白进行琼脂糖凝胶电泳()时,按从负极到
    都带负电,向阳极移动,分子量大带电荷少的移动慢 。即乳糜颗粒,极低密度脂蛋白,低密度脂蛋白,高密度脂蛋白

    Q5:请问电泳时DNA都是往正极跑的吗?
    正常情况下,都是往正极,DNA属于是酸性生成负离子 。极特殊情况比如你的buffer高度酸性,可能会相反 。

    Q6:关于电泳,电路上是电子由负极到正极 。那么胶体中
    电泳是在电场的作用下,使电荷移动的 。不是直接通电让电荷移动 。

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