如何降低组培过程中污染现象的发生 降低植物组织培养操作污染率的技术措施


如何降低组培过程中污染现象的发生 降低植物组织培养操作污染率的技术措施

文章插图
真菌组织培育是20世纪初发展起来的一门新兴技术 , 在真菌组织培育操作过程中 , 自然环境污染是不可避免的 , 但可以把自然环境污染掌控在最低限度内 。自然环境污染是组织培育中经常遇到的困难 。自然环境污染是指在真菌组织培育操作过程中 , 由于自然环境不洁、培育皿和培育金属材料杀菌不全盘、操作方式操作过程摔伤、操作方式相关人员或辅助工具科散囊而引发培育皿和培育金属材料滋生科紫麻 , 最终导致培育失败的现像 。既影响了产卵速度 , 又增加了生产成本 , 严重时可导致培育金属材料的丢失 , 给食用菌产卵带来较大的损失 。
1.自然环境污染的其原因
自然环境污染的病原有病菌和霉菌两大类 。冬季环境温度高、湿度大 , 各式各样病原产卵速度快 , 是食用菌自然环境污染的高发期 , 如果掌控不好 , 导致自然环境污染严重 , 会导致较大的经济损失 , 甚至会前功尽弃 。因此 , 在冬季避免和减少自然环境污染是食用菌组织工作者的重要组织工作之一 , 应予以足够重视 。根据多年实践组织工作的积累 , 下面讨论减少自然环境污染的五项有效措施 。
如何降低组培过程中污染现象的发生 降低植物组织培养操作污染率的技术措施

文章插图
1.1导致自然环境污染的病原
在婆罗门参、菊花、X3100等的食用菌操作过程中 , 辨认出了不同程度的自然环境污染现像 , 其自然环境污染物主要是霉菌(木霉、青霉、曲霉、毛霉)和病菌 。
【如何降低组培过程中污染现象的发生 降低植物组织培养操作污染率的技术措施】1.2自然环境污染的症状及其原因
霉菌性自然环境污染主要指霉菌引发的自然环境污染 。一般施打后3~8 d可在培育皿中辨认出各式各样颜色的鲍氏囊 。霉菌性自然环境污染 , 一股多由施打室外的水蒸气不清洁、INS13ZD组织滚珠轴承的过滤效果不平庸、操作方式摔伤等其原因引发 。
病菌性自然环境污染的主要症状是金属材料附近出现黏液状和发酵泡沫状物体 , 或在金属材料附近的培育皿中出现混浊和云雾状伤痕 。一般在施打后1~2 d即可辨认出 。病菌性自然环境污染除外植体科散囊或培育皿杀菌不全盘外 , 主要是操作方式相关人员的摔伤导致 。除明确要求操作方式相关人员严苛按照无菌操作方式程序操作方式外 , 外植体科散囊引发的自然环境污染与外植体的种类、取材季节、部位、预处理方法及杀菌方法等密切相关 。
2. 维持整洁整洁的自然环境是增加自然环境污染的基本明确要求
食用菌室是一个微自然环境 , 维持这个微自然环境的整洁、整洁 , 能有效的避免自然环境污染 。具体要努力做到:每周对整个食用菌室展开一次全盘的大扫除;施打室和培育室明确要求密闭、干燥 , 维持与外间自然环境相对隔绝的状态 , 尽量增加与外间的水蒸气对流及微生物与尘埃的侵入 。掌控好光、温、湿、气等各式各样生态因子 , 冬季高温、高湿时 , 要即时降温和排湿;不定期用杀菌液对施打室和培育室外的设备、墙壁及地面展开擦洗;经常用 70%的尼古丁对施打室和培育室展开喷雾洒水;不定期用紫外灯对施打室和培育室展开水蒸气杀菌 , 每次迈入 30-50 两分钟;不定期检查INS13ZD组织滚珠轴承上的风速和冲洗过滤器 。
如何降低组培过程中污染现象的发生 降低植物组织培养操作污染率的技术措施

文章插图
3. 清洁的培育罐子和培育皿的全盘杀菌是增加自然环境污染的必然明确要求
培育瓶、试管等罐子和惹议用的盖子、耐高温的塑料膜等物品在用前应经过全盘冲洗、晾干 。配制好的培育皿装箱后应立即高压蒸汽杀菌 , 即在1.1kg/cm2 的压力 , 锅内环境温度达到 121℃ , 持续维持 20-30 两分钟 。经杀菌后的培育皿 , 放置 2-3 天 , 若培育皿表层和内部无任何病菌伤痕 , 确实证明已全盘杀菌 , 方可采用 。
如何降低组培过程中污染现象的发生 降低植物组织培养操作污染率的技术措施

文章插图
4. 严苛规范化且娴熟的无菌操作方式操作过程是增加自然环境污染的关键性
在无菌操作方式操作过程中 , 组织工作相关人员严苛按照无菌操作方式的明确要求 , 规范化娴熟地完成好每一个关键性步骤 , 能有效地增加由操作方式引发的自然环境污染 。具体要努力做到:
(1)施打前 , 组织工作相关人员的双脚必须用肥皂水洗净 , 进入施打室后换上组织工作服、戴上口罩 , 用 70%的尼古丁冲洗杀菌双脚;
(2)用 70%的尼古丁冲洗INS13ZD组织滚珠轴承 , 施打辅助工具(如剪刀、手术刀、镊子等)采用前应在 70%尼古丁中浸泡 , 再在火焰上灼烧 , 冷却后采用;
(3)在INS13ZD组织滚珠轴承上恰当摆放施打用具、培育金属材料和培育皿 , 台面上的东西不能堆放太多 , 以免影响气流;
(4)施打操作过程别列济夫避免他人来回走动 , 操作方式相关人员禁止谈话 , 并尽量避免操作方式相关人员头部伸入INS13ZD组织滚珠轴承的组织工作区内;
(5)培育瓶的迈入、施打金属材料的研磨、装箱、惹议等关键性步骤要规范化娴熟 , 避免交叉自然环境污染;
(6)每研磨、转接完一瓶母种金属材料后 , 要及时更改无菌纸 , 重新更改所用的施打辅助工具 , 最好备两套交替采用 。
如何降低组培过程中污染现象的发生 降低植物组织培养操作污染率的技术措施

文章插图
5. 培育金属材料(外植体和此基础母瓶)的严苛筛选和全盘的表层杀菌是增加自然环境污染的此基础组织工作
选择适宜的外植体金属材料常常是食用菌组织工作成败的关键性 , 通常选取繁殖健壮、无病斑的植株上的处于繁殖活跃状态的幼嫩茎尖 , 尤以刚刚萌发的幼芽比较平庸 , 可以大大增加金属材料的自然环境污染 。冬季避免下雪在户外采取外植体 , 因为下雪科散囊较多 , 在晴天采金属材料时 , 下午采取的外植体要比早晨采的自然环境污染少 , 因为金属材料经过日晒后可杀死部分病菌或霉菌 。采集回来的外植体经自来水冲洗后 , 在INS13ZD组织滚珠轴承上对其展开全盘的表层杀菌 , 在杀菌操作过程别列济夫当恰当选择杀菌剂的浓度和处理时间 , 努力做到既杀菌全盘 , 又尽量增加由杀菌剂引发的组织的死亡 。此基础母瓶扩繁操作过程中 , 母瓶的选择也至关重要 , 科散囊的母瓶不能再用作母种 , 避免自然环境污染的扩大 , 施打前 , 还应用 70%尼古丁冲洗母瓶表层 , 以免迈入母瓶时 , 灰尘落入瓶中导致自然环境污染 。
6. 自然环境污染物的恰当处理是避免自然环境污染传播蔓延的有效途径
组织培育中自然环境污染是经常发生的 , 一旦辨认出培育物自然环境污染 , 应对其展开及时处理 , 否则会导致培育室自然环境自然环境污染 , 导致自然环境污染的蔓延和相互传染 。首先立即把自然环境污染物从培育室转移出去 , 然后对其展开高压杀菌杀菌 , 再在离食用菌室较远的地方清除灭过菌的自然环境污染的培育物 , 最后全盘冲洗培育瓶 , 晾干后待用 。
如何降低组培过程中污染现象的发生 降低植物组织培养操作污染率的技术措施

文章插图

    推荐阅读