细胞计数仪使用 vicell细胞计数仪原理

1、麻烦问一下血细胞计数仪的使用原理是什么就是将血细胞先稀释，然后再在有激光刻度的小格子里，显镜下数出大概的个数，统计得出。类似于观世界下的样方法。原理就是这样。血细胞分析仪亦称血球计数仪，说到血细胞自动化分析，就不得不提到“库尔特原理”，这是由wallace h. coulter先生在年代创立的用电阻法检测悬液中颗粒数量和大小的方法。变阻法计数在大多数细胞计数器中是利用小孔管换能器装置实现的。在仪器的取样杯内装有一根吸样管，吸样管下部开有一个小孔(宝石制作)，因此也叫做小孔管。小孔管内外各置一只铂金电极，两电极间施加一个恒定的电流。测试时，先将待测血液用洁净的电解液充分稀释，使血细胞在电解液中成为游散状态，然后在小孔管上端施以负压，在负压的抽吸下，混有血细胞的电解液便被均匀地抽进小孔管。当血细胞通过小孔时，排开了等体积的电解液，使电解液的等效电阻瞬间变大，这个变大的电阻在恒流源的作用下引起一个等比例增大的电压。当细胞离开小孔附近后，电解液的等效阻值又恢复正常，直到下一个细胞到达小孔。这样血细胞连续地通过小孔，就在电极两端产生一连串电压脉冲。脉冲的个数与通过小孔的细胞个数相当，脉冲的幅度与细胞体积成正比。

2、血球计数板测定原理是什么？它有哪些优点血球计数板（改良牛鲍计数板）用优质厚玻璃制成。每块计数板由H形凹槽分为2个同样的计数池。计数池两侧各有一支持柱，将特制的专用盖玻片覆盖其上，。计数池画有长、，分为个中方格，位于正中及四角5个中方格是红细胞计数区域，用单线划分为个小方格。四角的4个大方格是白细胞计数区域，用单线划分为个中方格。根椐国际标准局（NBS）规定，大方格每边长度允许误差为±**^

3、血球记数法的原理是什么？产生对比，血球密度已知，换算被测得密度，或是得到相对的密度。。。。。。科学记数法是把一个数写成 a ×的n次方的形式，其中 1≤a＜，n是整数。

4、流式细胞仪计数法原理是什么流式细胞仪是通过激光对通过激光束的颗粒进行计数。当颗粒或者细胞通过激光束的时候，会对光线产生折射和反射。这个折射和反射的信被探测器记录下来。每通过一个细胞，就会产生一个峰值，最后记录峰值的个数，就可以计数了 ?一、原理在正常细胞中，磷脂酰丝氨酸（ps）只分布在细胞膜脂质双层的内侧，而在细胞凋亡早期，细胞膜中的磷脂酰丝氨酸（ps）由脂膜内侧翻向外侧。annexin v是一种分子量为依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力，故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此annexin v被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。将annexin v进行荧光素（egfp、fitc）标记，以标记了的annexin v作为荧光探针，利用荧光显镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生。碘化丙啶（propidium iodide, pi）是一种核酸染料，它不能透过完整的细胞膜，但对凋亡中晚期的细胞和死细胞，pi能够透过细胞膜而使细胞核染红。因此将annexin v与pi匹配使用，就可以将处于不同凋亡时期的细胞区分开来。二、注意事项 1、必须活细胞检测，不能用能破坏细胞膜完整性的固定剂和穿透剂固定或穿膜。2、特殊细胞的染色方法：在消化或吹时，有些细胞（如神经细胞）很容易受到损伤，导致晚期凋亡或坏死比例非常高，不能反映真实结果。实验的解决方法：先低速离心，吸取细胞培养板中的液体，留少许液体，加入适量pi和annexinv染色min后，将漂浮细胞吸至离心管中，离心洗涤两次，用pbs漂洗贴壁细胞两次，加胰酶消化后将细胞悬液移至另一离心管中，离心洗涤，再与漂浮细胞合并后上流式细胞仪检测。应用该法可降低晚期凋亡和坏死比例，增加早期凋亡细胞比例。3、由于annexinv为钙离子依赖的磷脂结合蛋白，只有在钙离子存在的情况下与ps的亲和力才大，因而在消化细胞时，建议一般不采用含edta的消化液。4、必须设置阴性对照和补偿对照（分别单染）。

5、血细胞分析仪检测原理血细胞分析仪主要用于血细胞数量的测量、血红蛋白浓度测定以及白细胞分类，并通过计算给出各细胞相关参数，是临床检验科室使用率最高的常规设备之一。为了更好地了解和使用血细胞分析仪，我们首先要明白它的检测原理。康宇医疗血细胞分析仪的检测原理为库尔特原理，是在计数管内外各放置一支铂金电极，两电极间施加一个恒定的电流，测试时先将待测血用洁净的电解液充分稀释，使血细胞在电解液中成为游散装状态，然后在计数管上端施以负压，利用血细胞经过计数管宝石孔时的电阻改变而获得电脉冲，脉冲数代表血细胞个数，从而达到计数的目的。。即在一定的电导率的细胞稀释液中细胞通过计数小孔就会产生一个电阻脉冲，红细胞体积大产生的脉冲就大，血小板体积小，产生的脉冲就小，以此区分两者。另外稀释液是等渗液可以保持红细胞跟血小板的形态不变。所以可以在一个通道中。，是加溶血素后细胞脱水后的大小，因为粒细胞颗粒多体积表现大，单核则位于中间。，属于模拟信，所以说要经常进行仪器校正。
6、血球分析仪原理您查询的关键词是：分析仪原理。如果开速度慢，可以尝试快速版；如果想保存快照，可以添加到搜藏。(和网页的作者无关，不对其内容负责。快照谨为网络故障时之索引，不代表被搜索网站的即时页面。) 血细胞分析仪的工作原理及其近期发展姜穗 (温州医学院附属第二医院临床工程科浙江省温州市 ) [摘要]本文简要介绍了血细胞分析仪的主要工作原理,各主要在血细胞分析仪上采用的白细胞分类技术及业界的技术进展. [关键词]血细胞分析仪,红细胞,血小板,白细胞,计数 The Work Principle Of Hematology Analyzer And Its Near Period The Development Jiang Sui (Clinical Engineering Department of The Second Hospital of Wenzhou Medical College, Wenzhou Zhejiang ,China) Abstract:Tise paper introduces the major principle of hematology analyzer,the categorized technology of white blood cell mainly used by manufacturer and the development of analyzing technology. Keyword: hematology analyzer,red blood cell,platelet,white blood cell,counter 自年代初库尔特先生发明了粒子计数技术的专利,制造了第一台血细胞分析仪并应用于临床以来,(Cell Counter)仅能计数红细胞(RED)和白细胞(WBC),后来又有了血红蛋白(HBG),血小板(PLT),红细胞压积(HCT),平均红细胞体积(MC)(Hematology Analyzer)后,又增加了许多分析和计算参数,如红细胞体积分布宽度(RDW),平均血小板体积(MP),血小板体积分布宽度(PDW),血小板压积(PCT),大血小板比率,白细胞三分群,白细胞五分类,血红蛋白浓度分布宽度,异常淋巴细胞提示,幼稚细胞提示等各种参数和功能也不断地添加到一些品牌的仪器上. 电阻检测法的基本原理是:在待测液体中置一孔,在孔的两端各加一定电压的电极,当液体中的颗粒巾进经过孔时,电极间的电阻就会产生训瞬间的变化,以因而产生电脉冲,对这种电脉冲进行计数就可得到颗粒的数量,脉冲幅度的大小表示颗粒的体积的大小,经过对各种细胞所产生脉冲的大小的电子的选者择,可以区分出不同种类的细胞;在液体中加上一定的负压就能使经过孔的液体流动. 随着电子技术,流式细胞技术,激光技术,电子计算机技术和新荧光化学物质等多种高科技技术在临床检验工作的应用,使血细胞分析仪在自动化程度,先进功能和完美设计方面提高到了一个崭新的阶段,血细胞分析仪已经不仅仅局限在进行常规的血细胞分析,还增加了许多扩展功能,例如将网织红细胞(RET)的计数和分析功能加入其中,一些仪器还另外增加了幼稚细胞分析和有核红细胞分析功能,甚至对血液细胞中某些寄生虫进行提示,更有一些仪器把流式细胞分析仪的某些功能和并到血细胞分析仪上,在进行常规血细胞分析时可得到某些淋巴细胞亚群的分析结果. 在常规血细胞计数仪上,红细胞(RBC),血小板(PLT)共用一个测量通道,血红蛋白含量(HGB)的测定在任何类型,. 血红蛋白含量测定血红蛋白含量的测定是在被稀释的血液中加入溶血剂后,使红细胞释放出血红蛋白,后者与溶血剂结合形成血红蛋白衍生物,进入血红蛋白测试系统,在特定波长(一般在nm)下比色,吸光度的变化与液体中Hb含量成比例,. 血红细胞及血小板的检测血红细胞的检测是血液分析仪的重要组成部分,红细胞的检测以往主要还是使用阻抗法对红细胞的数目和体积计数,(3D) 以光散射法检测红细胞,以低角度前向光散射和高角度散射两个测量系统同时测量1个红细胞,根据低角度光转换能量的大小测量单个红细胞体积与总数;根据高角度的光散射得出单个血红蛋白浓度,可准确得出MC(平均红细胞体积),MCH(平均血红蛋白含量),MCHC(平均血红蛋白浓度)测定值,并绘出红细胞散射图,单个红细胞体积及红细胞内Hb含量的直方图及出RWD(红细胞体积分布宽度),HDW(红细胞血红蛋白分布宽度)等参数. 由于血小板和红细胞体积的明显差异,: 扫流技术(sweep flow):由于血小板和红细胞在同一个计数池中计数,红细胞体积较大,在通过正中计数感应区时会形成一个大脉冲,若有回流会同时又产生一个因涡流再度进入感应区边缘而形成的小脉冲使电极可能感应到相当于血小板大小的小脉冲,. 防反流装置:为防止以被计数的红细胞又回到感应区,在红细胞计数池小孔的内侧按装一块带孔的小板,板上小孔的直径比红细胞计数孔略大,正好位于计数孔的后方,. 鞘流技术(sheath flow):为了避免计数中血细胞从小孔边缘处流过及湍流,涡流的影响,;另一种为激光计数原理,细胞液流室较长,与激光垂直相交,激光光束对流经的每一个细胞照射后产生光散射,利用此原理进行细胞计数. 浮动界标:正常标本中红细胞与血小板体积相差较大,一般将红细胞与血小板的界限定于fl,大的为红细胞,小的为血小板,;反之,如果红细胞体积偏小(如缺铁性贫血,地中海性贫血),则可能将部分小红细胞误计为血小板,(floating threshold). 此外,还有延时计数(extended count),拟合曲线(fitting curve)等技术以确保计数结果和体积分布图的准确性. 三,白细胞计数及分类在早期的单分类仪器中,WBC的计数是将病人的血样经抗凝后按一定比例稀释,再加入溶血剂(作用是使细胞膜皱缩,周围的胞浆慢慢从细胞内扩散,但细胞颗粒仍在),使经过这样预处理的病人血样成为有悬浮颗粒的液体,*直径为*(小细胞亚群),中性细胞(单核细胞亚群)和粒细胞群(大细胞亚群). 近期血细胞分析仪测试原理的改进,. 下面就各大对白细胞的分类采用的各种不同方法做些介绍. Coulter的CS联合检测技术 CS技术即体积测量,高能电磁波传导性和激光散射技术(见原理图1). (°～°)对每个细胞进行扫描分析,测定其散射光强度,从而提供细胞结构,. 图1,CS法白细胞分类原理 (erythrolya)使红细胞溶解,然后加入抗溶血剂(stabilyse)起中和溶血剂的作用,使白细胞表面,胞质及细胞大小等特点仍保持与体内相同的状态,由于不同的细胞在细胞体积,表面特征,内部结构如核浆比例和颗粒构型及质量等方面完全一致的几率很小,加上仪器配备了先进软件,可与流式细胞仪一样调较,设置门限,可在三维图像上将各细胞较好的分开,达到较准确的分类,同时可提示幼稚白细胞,(抗原)标志的淋巴细胞结合相应的球而改变该细胞的CS性质,在分析仪上直接计数CD4和CD8淋巴细胞,·S细胞分析仪为代表. Bayer的光散射与细胞化学联合技术 (白细胞分类)(组化染色酶反应强度),Y轴代表光散射(细胞大小),一起定位于细胞图上(cytogram). 血液中五种白细胞的过氧化物酶活性排列顺序为:嗜酸性粒细胞>中性粒细胞>(H°5°)和高角度(5°°)(细胞大),故散射强;高角度反映核叶数目及大小,核叶多,核图2,过氧化物酶通道白细胞分类原理图 ;同时还可在红细胞稀释液中加入可染RNA的荧光染料,经激光照射激发后,对其中的网织红细胞进行计数,分类,得到八个网织红细胞参数. 由于其采用化学染色方法来分析细胞类别,故其共使用了种试剂来进行测试,运行成本较高. 雅培(Abbott)采用的多角度偏振光散射(MAPSS)技术 (只有碱性粒细胞颗粒因有吸湿特性而其结构有较改变),红细胞在该鞘流液中细胞膜完整且和鞘流液的吸光指数相等,(集中于一直径°D的衍射差,将嗜酸性和中性细胞分开,而嗜碱性粒细胞,淋巴细胞及单核细胞,则按其大小和内部结构的复杂性不同,所产生的散射光也各异,. 4,Sysmex的射频(RF)加直流阻抗式(DC)的白细胞分类技术典型机型如SysmexSE/: 淋巴,单核,粒细胞(中性粒细胞,嗜酸性粒细胞,嗜碱性粒细胞)检测系统:该系统采用电阻抗与射频联合检测方式,使用作用较温和的溶血剂,(DC)和核及颗粒密度(RF).由于淋巴细胞,单核细胞及粒细胞的大小,细胞质含量,核形态与密度均有较大差异,故可通过扫描得出其比例. 嗜酸性粒细胞检测系统:. 嗜碱性粒细胞系统:该系统检测原理与嗜酸性粒细胞相同,不同的是其溶血剂只能保留血液中的嗜碱性粒细胞. 幼稚细胞检测系统:. 网织红细胞计数网织红细胞(简称网红). 网红细胞是晚幼红细胞脱核后到完全成熟红细胞之间的过渡细胞,由于其胞浆中残存嗜碱性物质,在活体可被蓝染成蓝色细颗粒或网状物而得名.,在红细胞的发育过程中,RNA含量有明显规律性的变化,即由原始阶段较为丰富逐渐减低,(RET%). 年以来,可进行网红计数的血细胞分析仪相继问世, Maxam和Technicon H* Maxam采用了两种试剂,一为新亚甲蓝着染红细胞内的RNA,另一为透明剂使红细胞内血红蛋白溢出,成为影细胞(MCr)和网红成熟指数(MI).实验证明其结果与FCM法高度相关(r=).Technicon H*3测试网红则先将3ul血液加入已标准化的染液中孵育分钟,将仪器转换到网红计数程序进行检测,(网红体积分布宽度),CHr(网红内血红蛋白量),HDWr(网红内血红蛋白分布宽度)(LFR),中(MFR),高(HFR). 综上所述,由于近年来综合性高科技的飞速发展,血细胞分析仪上也不断采用最新的电子,光学,化学和计算机技术,从而不断满足临床工作对血细胞分析的要,各朝着高速度,多参数,多功能合成及操作更灵活和方便上发展,近期各更是推出了血液分析仪的全自动流水线化,将血液常规分析,网织红细胞分析,血片的制备(选择,涂片,编,染色,干燥). 参考文献: 1,许文融,谷俊侠主编,《临床血液学检验》,南京:东南大学出版社出版 2,丛玉隆等主编,《血细胞分析技术与临床》,天津:天津科学技术出版社 3,王淑娟等主编,《现代血细胞学图谱》,人民卫生出版社拜尔《拜尔诊断》 BECKMAN COULTER及Sysmex等产品通讯
【细胞计数仪使用 vicell细胞计数仪原理】

细胞计数仪使用 vicell细胞计数仪原理

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