cck8比色法原理 cck-8比色法原理

1、比色法原理是什么   比色法的基本原理是朗伯(Lambert)定律,阐述为:光被透明介质吸收的比例与入射光的强度无关;在光程上每等厚层介质吸收相同比例值的光 。公式为:A=lg(1/T)=Kbc (A为吸光度;T为透射比, 即透射光强度与入射光强度之比;c为吸光物质的浓度,单位mol/L;b为吸收层厚度,单位cm ) 即当一束平行单色光垂直通过某一均匀非散射的吸光物质时, 其吸光度A与吸光物质的浓度c及吸收层厚度b成正比. 在科学研究和生产过程中,为及时了解培养中生物的生长情况,需定时测定培养液中生物的数量,以便适时地控制培养条件,获得最佳的培养物 。比浊法是常用的测定方法 。比浊法是在浊度计或比色计上进行测定培养液中生物的数量 。某一波长的光线,通过混浊的液体后,其光强度将被减弱 。入射光与透过光的强度比与样品液的浊度和液体的厚度相关 。如果样品液层厚度一定,则OD值与样品的浊度相关,根据此原理,可通过测定样品中的OD值来代表培养液中的浊度即生物量 。也可同时做平板计数法,对比一定混浊度所含活菌数制成曲线 。本法测定的是生物的总量 。适用于菌体分散良好的非丝状单细胞生物的测定 。在进行大量培养时,此法比平板计数法能较快得出结果,省时省力 。原理:就是以有色化合物的显色反应为基础,通过比较(目视比色法)或测量(光电比色法)有色物质溶液颜色深度来确定待测组分含量的方法. 特点:光电比色法一般来说比目视比色法较灵敏、准确,现在来说应该是比较老的技术了吧,特点也不突出了吧. 通过标准试液(已知浓度)与某物质反应形成颜色深浅不同的溶液,把你要测定的溶液对比,这样可以确定它的大致范围 。

2、CCK-8的优点   去文库,查看完整内容> 内容来自用户: CCK8法 一.实验原理 CCK[化学名:硝基苯基)(H四唑单钠盐],它在电子载体Methoxy PMS)的作用下被细胞中的脱氢酶还原成具有高度水溶性的黄色甲瓒产物 。生成的甲瓒物的数量,颜色的深浅和活细胞的数量成正比,与细胞毒性成反比 。使用酶标仪在nm波长处测定OD值,间接反映活细胞的数量 。二.实验步骤 1)制作标准曲线 ?(ul /孔) 。按,% CO小时) 。?的CCK 8溶液 (注意不要在孔中生成气泡,) 。。一般为0h, 。nm处的吸光度,绘制标准曲线 。2)细胞活性检测(或者用于预测cck8最佳孵育时间) ?(ul /孔) 。将培养板放在培养箱预培养(在的条件下),直到细胞贴壁完全(一般. CCK8试剂盒具有以下优点: cell counting kit【化学名:硝基苯基)(h四唑单钠盐】,它在电子载体methoxy pms)的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物(formazan dye) 。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比 。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析 。、灵敏度高,甚至可以测定较低细胞密度;、为1瓶溶液,毋需预制,即开即用 。

3、纳氏试剂比色法的比色法   纳氏试剂比色法 1 原理 碘化汞和碘化钾的碱性溶液与氨反映生成淡红棕色胶态化合物,其色度与氨氮含量成正比,通常可在波长nm范围内测其吸光度,计算其含量. (光度法),测定上限为2mg/. 2 仪器 带氮球的定氮蒸馏装置:mL凯氏烧瓶,氮球,直形冷凝管和导管. 分光光度计 pH计 3 试剂 配制试剂用水均应为无氨水 无氨水可选用下列方法之一进行制备: 蒸馏法:. 离子交换法:使蒸馏水通过强酸型阳离子交换树脂柱. 1mol/L盐酸溶液. 1mol/L氢氧化纳溶液. 轻质氧化镁(MgO):将氧化镁在℃下加热,以除去碳酸盐. . 防沫剂,如石蜡碎片. 吸收液: 硼酸溶液:称取L. . 纳氏试剂:可选择下列方法之一制备: 称取)结晶粉末(约g),至出现朱红色沉淀不易溶解时,改写滴加饱和二氯化汞溶液,并充分搅拌,当出现量朱红色沉淀不再溶解时,停止滴加二氯化汞溶液. 另称取mL,. 称取g氢氧化纳,溶于mL水中,充分冷却至室温. 另称取7g碘化钾和碘化汞(HgI2)溶于水,然后将此溶液在搅拌下徐徐注入氢氧化纳溶液中,用水稀释至mL,贮于聚乙烯瓶中,密塞保存. 酒石酸钾纳溶液:称取OO)溶于mL水中,加热煮沸以除去氨,放冷,定容至Ml. 铵标准贮备溶液:℃干燥过的优级纯氯化铵(NH4Cl)溶于水中,移入mL容量瓶中,. 铵标准使用溶液:. 4 测定步骤 水样预处理:取mL,),移入凯氏烧瓶中,加数滴溴百里酚蓝指示液,. 采用酸滴定法或纳氏比色法时,以mL硼酸溶液为吸收液;采用水杨酸次氯酸盐比色法时,. 标准曲线的绘制:吸取0,. 由测得的吸光度,减去零浓度空白管的吸光度后,得到校正吸光度,绘制以氨氮含量(mg)对校正吸光度的标准曲线. 水样的测定: (),加入mL比色管中,稀释至标线,. 分取适量经蒸馏预处理后的馏出液,加入mol/L氢氧化纳溶液,以中和硼酸,. 空白实验:以无氨水代替水样,做全程序空白测定. 5 计算 由水样测得的吸光度减去空白实验的吸光度后,从标准曲线上查得氨氮量(mg)后, 按下式计算: 氨氮(N,mg/L)=m/× 式中:m——由标准曲线查得的氨氮量,mg; ——水样体积,mL. 6 注意事项: 纳氏试剂中碘化汞与碘化钾的比例,. 滤纸中常含痕量铵盐,. 查了一下,在日语中,应该可以将这种方法直接说成 ネスラー法 【纳氏法】 另外,纳氏试剂对应的日语是 【ネスラー(nessler)试薬】 供参考

4、比色法测定物质含量的原理   原理:由于分子中的某些基团吸收了紫外可见辐射光后,发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱 。它是带状光谱,反映了分子中某些基团的信息 。可以用标准光图谱与测得的光谱作比较进行定性分析 。再根据LambertBeer定律:A=εbc,(A为吸光度,ε为摩尔吸光系数,为液池厚度,c为溶液浓度)可以对溶液进行定量分析 比色法定义:以生成有色化合物的显色反应为基础,通过比较或测量有色物质溶液颜色深度来确定待测组分含量的方法 。比色法作为一种定量分析的方法,开始于世纪年代 。比色分析对显色反应的基本要是:反应应具有较高的灵敏度和选择性,反应生成的有色化合物的组成恒定且较稳定,它和显色剂的颜色差别较大 。选择适当的显色反应和控制好适宜的反应条件,是比色分析的关键 。待测样品本身在紫外可见光区没有强吸收,或在紫外光区虽有吸收,但为了排除干扰、增加选择性或提高测定灵敏度,可加入适当的显色剂,使待测样品与显色剂的反应产物的最大吸收波长移至可见光区,这种测定方法称为比色法 。这种分析方法可以用于药物的定性、定量测定 。由于分子中的某些基团吸收了紫外可见辐射光后,发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱 。它是带状光谱,反映了分子中某些基团的信息 。可以用标准光图谱再结合其它手段进行定性分析 。根据LambertBeer定律:A=εbc,(A为吸光度,ε为摩尔吸光系数,为液池厚度,c为溶液浓度)可以对溶液进行定量分析

5、cck-8实验结果怎么统计   数据采集方法具体点, 1、已取得5天的结果: 如果是连续每天一组数据,那么各组现已有第一天至第五天五组数据,组内比较采用重复测量方差分析 两组间比较(每天)用独立样本T检验 2、如果不是连续每天一组数据: 组内比较采用配对T检验 两组间比较用独立样本T检验 3、SPSS只能输入小数点后两位,不够精确怎么办? 可以在变量视图界面修改小数位数 还是比较常用的. 但是因为mtt价格相对cck,、小时后分别用酶标仪检测,检测波长为nm.
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